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快速蛋白铜染试剂盒
产品编号 | 规格 | 运输 |
RTD6207 | 10 T | RT |
● 产品简介：
本试剂采用以铜离子为基础的负染色方法，用于SDS-PAGE或Native-PAGE电泳凝胶染色，不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸，实验方便快速，可以在30 min左右完成，最低能够检测出2 ng的蛋白条带，该方法不对蛋白质产生修饰作用，而且经过脱色液处理后，可以用于电洗脱或采用PAGE胶蛋白微量回收试剂盒（货号：RTD8108）进行胶回收，以便进行质谱和测序分析等，也可以用于电转移或用其他染色方法（银染或考染）对胶重新染色。
按照每次使用50 ml1×即用型染色液计算，本产品可以染色 8-10块mini-PAGE（8×10cm）胶。
● 产品组成：
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 贮存 | 运输 |
RTD6207-01 | 增强液（4×） | 100 ml | 4-8℃ | RT |
RTD6207-02 | 染色液（10×） | 60 ml | 4-8℃ | RT |
RTD6207-03 | 脱色液（10×） | 100 ml | 4-8℃ | RT |
- | 说明书 | 1份 | - | - |
● 储存条件
按照标签温度贮存，常温运输。开封后一年有效。
● 凝胶染色的操作步骤：
以下步骤以一块1 mm厚度8×10cm的凝胶操作为例。
一. 漂洗：
取出电泳后的 PAGE 凝胶，用超纯水漂洗两次，每次1分钟。
二. 前处理：
2.1 准备工作：将增强液（4×）用超纯水稀释4倍，配成1×增强液。
2.2 凝胶中加入50 ml 1×增强液，常温摇床慢摇10分钟。
三. 漂洗：
弃增强液，用超纯水漂洗凝胶两次，每次10-20秒，至泡沫完全清除干净。
注：漂洗时间不要太长，否则会导致染色效果下降。
四. 染色：
4.1 准备工作：将染色液（10×）用超纯水稀释10倍，配成1×即用型染色液。
注：染色液略成半浑浊状态。
4.2凝胶中加入 50 ml 1×即用型染色液，摇床慢摇5-10分钟，观察结果：在黑色背景下，可见光观察，蛋白条带为棕褐色，无蛋白区域为蓝绿色；可见光灯箱观察（凝胶底部打光），蛋白质条带反显白色，无蛋白的胶区则为黄绿色。
五. 漂洗：
弃染色液，超纯水洗涤凝胶2次，每次摇床慢摇1分钟。
注：凝胶可以在水中保存1-2周。
六. 脱色：
6.1 准备工作：将脱色液（10×）用超纯水稀释10倍，配成1×即用型脱色液。
6.2 如需要进行蛋白切胶回收，将所需的蛋白质条带切下，用超纯水漂洗切下的凝胶一次；如凝胶需要考染，银染或转膜实验，直接用超纯水漂洗整个凝胶一次。
6.3 弃水，凝胶中加入适量1×即用型脱色液覆盖凝胶，摇床慢摇5分钟，倒掉脱色液；
6.4 重复脱色步骤2次。脱色完全的标志是白色凝胶完全脱色为无色透明。
6.5 超纯水漂洗凝胶两次，进行后续实验操作。
实验示例：
4-20% RealPAGE Precast Gel
lane 1-5: BSA分别为1，2，3，4，5μg
M：RTD6149 10-250kD
lane 6: Bacterial Lysis
凝胶显影后(脱色前)蛋白条带在黑色背景下为蓝绿色（左）
可见光灯箱观察(凝胶底部打光),蛋白质条带反显白色（右）
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商品宽分子量非变性电泳蛋白质Marker 21-880 kD
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商品10×阴极缓冲液（多肽电泳用）
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商品UNveil Unstained Protein Ladder（10 to 200 kDa）
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商品OneStep Blocker – Western Blocking Solution and Signal Enhancer SIZE: 500ml
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商品Cesium
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商品DEPC Treated Water, Autoclaved
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商品Leica Acid Alcohol 酸酒精
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商品gmPfu DNA Polymerase
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