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蛋白浓缩试剂盒（目录号：RTD9101）
● 试剂盒内容及保存：
货号 | 产品名称 | 规格 | 贮存 |
RTD9101-01 | 试剂A-沉淀溶液 | 10 ml | RT |
RTD9101-03 | 试剂C-助沉剂 | 5 ml | RT |
RTD9101-04 | 试剂D-中和液 | 250 μl | RT |
RTD9101-05 | 1 M NaCl | 1 ml | RT |
RTD9101-06 | 1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（变性，还原） | 1 ml | -20℃ |
| 说明书 | 1份 |
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● 储存条件和效期：
试剂盒常温运输；收到后，按照标签温度贮存；本试剂盒有效期1年。
● 产品简介：
试剂盒原理：在酸性条件下蛋白质形成不溶性盐，使蛋白质变性导致构象发生改变，蛋白暴露出较多的疏水性基团，蛋白发生聚集而沉淀。为了避免酸对后续电泳的影响，沉淀的蛋白要使用丙酮等洗涤液彻底清洗去除酸。浓缩后的蛋白可以用于SDS-PAGE和Western blot 前的蛋白样品处理。
以每次浓缩800 μl蛋白样品计算，本试剂盒可以使用40-45次。
● 操作方法：
1. 准备1.5 ml干净的离心管，加入800 μl蛋白样品溶液。
可选：如果样品溶液中离子强度低于10 mM，补加8 μl的1M NaCl溶液。低于800 μl的样品，加入8 μl 1 M NaCl，用水补齐体积至800 μl，使NaCl终浓度为10 mM。
2. 加入蛋白溶液1/10体积的试剂C-助沉剂-80 μl，混匀，常温静置15分钟。
注：加入试剂C后溶液变浑浊。
3. 加入步骤2溶液1/4体积的试剂A -220 μl，涡旋震荡10-30秒，使之充分混匀。
4. 冰浴放置15分钟。
5. 4℃，12000 rpm（13000 g）离心10 分钟。 注：离心后白色蛋白沉淀弥散性可见于离心管管壁上。
6. 小心去掉上清液，保留沉淀。
注：请小心操作，可以用移液器辅助彻底吸弃上清。
7. 沉淀中加入600 μl预冷的丙酮（自备，试剂盒不提供），涡旋震荡10-30秒，彻底混匀。
注：丙酮有刺激性气味，请在通风橱内操作。
8. 冰浴15分钟。
9. 4℃，12000 rpm（13000 g) 离心10分钟；在通风橱中，倒掉上清。残留上清用10 μl吸头彻底吸弃，沉淀物通风晾干30-60秒。注：沉淀不能过分干燥，否则将导致蛋白不好溶解。
10. 蛋白溶解：
根据下表选择溶解缓冲液：
下游实验 | 溶解缓冲液 |
| 备注 |
SDS-PAGE电泳 | 1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（变性，还原） | 试剂盒提供 | 加入溶解缓冲液后，彻底溶解沉淀（37℃温浴处理），溶液正常颜色应为蓝色；如果溶液为淡绿色或黄色，加入1/10体积中和液D，使颜色变回蓝色。 95℃ 处理5分钟，电泳上样 |
BCA蛋白定量 | 40mM 碳酸钠pH11.25 | 试剂盒不提供 | BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度 |
等电聚焦IEF/2D电泳 | 7M尿素，2M硫脲，40mM Tris，1%C7B2O或1% ASB-14 pH10.4 | 试剂盒不提供 |
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酶切实验 | 100 mM碳酸氢铵 pH8.5 | 试剂盒不提供 |
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●实验示例：
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商品10×BN/CN PAGE电泳缓冲液（粉末型）
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商品6.5 kD单条蛋白Marker
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商品4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8
特價0
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商品1×Western半干转转膜缓冲液（粉末型）
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商品超低分子量蛋白电泳试剂盒（变性电泳）
特價0
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商品高分子量蛋白Marker（43-200KD）非预染
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商品UltraScence Pico Ultra Western Substrate SIZE: 50ml x 2 / Set (中階)
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商品OneStep Blocker – Western Blocking Solution and Signal Enhancer SIZE: 500ml
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商品Leica Micrimouint 封片膠
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商品iTaq™ Universal SYBR® Green 混合試劑
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