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超低分子量蛋白质Marker I（3.3-22kD）
Ultra Low Molecular Weight Protein Marker I
●产品编号及规格：
RTD6101 10T（100μl） 200元
● 储存条件：
-20℃保存，开封后有效期12个月。
● 产品简介：
本产品包含3种多肽和2种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.3kD-22kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。
● 使用说明：
第一次收到该产品，常温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底。
一. 制胶：
I 配制分离胶
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40% PAA（19:1）、4×凝胶缓冲液（货号:GB010）和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2．加入10%APS和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的无水乙醇，使凝胶表面保持平整。
4．静置15-30分钟，待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一 （一块1 mm mini胶用量）
| 分离胶 | 浓缩胶 |
| 18％T, 5%C /5 ml | 5％T, 3.3%C/2 ml |
40% PAA（19:1） | 2.25 ml | / |
40% PAA (29:1) | / | 0.25 ml |
4×凝胶缓冲液 | 1.25 ml | 0.5 ml |
乙二醇（电泳级） | 1.5 ml | / |
ddH2O | / | 1.25ml |
10％APS | 50 μl | 20 μl |
TEMED | 5 μl | 2 μl |
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的乙醇层，用滤纸将残留乙醇吸去。
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA（29:1）和4×凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2．加入10%过硫酸铵和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
4．静置30-60分钟装待凝胶聚合
二. 电泳：
1. 取Marker样品，充分混匀后，95℃处理5分钟。
2. 电泳前，将10×阳极缓冲液（Cat No:AB080）和10×阴极缓冲液（Cat No:CB010）用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的外槽加入1×阳极缓冲液，内槽加入1×阴极缓冲液，轻柔拔出梳子，将Marker或蛋白样品（已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理）加入点样孔，参考下表进行电泳，至每条带都清晰可见时停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。
表二 多肽电泳条件
恒电压 | 150V |
起始电流 | 60-75mA/板胶 |
结束电流 | 15-25mA/板胶 |
电泳时间 | 2.5-3小时 |
多肽电泳配套试剂
名称 | 货号 | 规格 |
RTD6120 | 10次 | |
RTD6101 | 10次（100 μl） | |
RTD6125 | 10次（50 μl） | |
RTD6110 | 10次 （50 μl） | |
RTD6145-01 | 10次 （50 μl） | |
AC1914-01 | 100ml | |
AC2914-01 | 100ml | |
GB010-100ml | 100ml | |
TP050 | 10×1ml | |
RTD6202 | 500ml | |
EA0582-02 | 100 ml | |
CB010P | 500 ml | |
AB080 | 250 ml | |
CB010 | 100 ml |
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