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非变性蛋白电泳Marker转膜问题
http://www.real-times.com.cn/news_detail.aspx?NewsID=248
高分子量非变性电泳蛋白质Marker II（45-669 kD）
High Molecular Weight Native Electrophoresis Protein Marker II
● 产品编号及规格：
RTD6142 20次（100 μl）
● 储存及运输条件：
-20℃贮存；常温运输，开封后有效期为12个月。
● 产品简介：
本产品是5种蛋白质混合物，分子量范围为45-669kD，经过非变性电泳后，用考马斯亮蓝染色后可以得到分布均匀密度相近的5条带：
蛋白名称 | 分子量(kD) | 说明 | pI |
Thyroglobulin | 669 | 球蛋白 | 4 |
Ferritin | 440 | 脱铁后铁蛋白单体 | 5.3-5.8 |
Recombinant protein | 228 | 昆虫球蛋白，单体分子量57 kD，非变性下为四聚体 | 4.9-6.3 |
BSA | 66 | 球蛋白，单体分子量66 kD，非变性下可形成少量二聚体 | 4.6-5.8 |
Ovalbumin | 45 | 球蛋白，分子量为45kD，非变性条件下大于45kD会出现电荷异构体（charge isomer） | 4.71或4.59 |
● 使用说明：
1. 常温融化后，彻底混匀，上样电泳。
注：上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来，0.75mm×5mm（厚度×宽度）的加样孔上样5 μl，其他规格梳子请适当调整上样量。
2. 电泳结束后，染色，观察结果。
注：使用银染时，由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法，可以适当降低Marker上样量，一般稀释50倍。
注意：
1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳（SDS-PAGE），因为在SDS存在下，含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。
2. 在非变性条件下，蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关。因此，在一种凝胶浓度下使用本Marker不能精确估计出目的蛋白的分子量。非变性电泳中，蛋白分子量的确定应该是在不同凝胶浓度下，确定出蛋白的Rf值，绘制出凝胶浓度对Rf的曲线从而判定蛋白的分子量。
● 实验示例：
8% Laemmli Native Gel（Cat:RTD6130）
1×TG 稳压150V 35-9 mA 85 min
lane 1，2 RTD6142 非变性蛋白Marker 5 μl
lane 3 BSA 2 μg
lane 4 Ovalbumin 2 μg
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